可見分光光度計有些廠家的721和722外觀上根本看不出來有啥區(qū)別，當然硬件和軟件上是有區(qū)別。分光光度計作為一種理化分析儀器，廣泛應用于工廠、礦山、醫(yī)院以及科研單位的化驗室，可在光譜區(qū)域360～800nm內(nèi)對樣品進行定性定量的分析。下面以最常見的721型可見分光光度計為例，分析它的常見故障與維修。1、光路無光或能量檔顯示不到1 00％ (其余部分正常) 該現(xiàn)象說明儀器電路無故障，只是光路系統(tǒng)需要調(diào)整。將波長盤轉(zhuǎn)到580nm 處，應有一明顯、完整的長方形黃色光斑，若沒有或很模糊，應對光路進行調(diào)整。首先，按單色器入射狹縫高度，調(diào)整好光源燈高度，然后左右調(diào)整反射鏡位置，使反射光進人人射狹縫。固定好反射鏡后，繼續(xù)調(diào)整反射鏡背部螺絲，使進入單色器入射狹縫的光強為最大。2．開機后光源燈不亮應先檢查燈電壓和光源燈的 “通、斷”情況。光度計光源燈燒毀的現(xiàn)象較少，可能燈電壓沒有加上，此時應檢查燈電源穩(wěn)壓部分。在燈穩(wěn)壓電路中，集成運放F004A為核心元件，在運放外圍元件完好的情況下，調(diào)整運放的輸入端電位器 W1，在輸出端應有一電壓變化，若沒有，說明運算放大器損壞。然后，再檢查功率放大管，若還沒有解決，應向前檢查整流塊，否則，就是變壓器故障。
3、旋轉(zhuǎn)100％，光源燈亮度變化不大 (其余部分正常) ‘ 該現(xiàn)象也屬于整機調(diào)整，儀器面板上100％旋鈕均為細調(diào)，W1為粗調(diào)。將儀器零點調(diào)整好后，將面板上 100％旋鈕調(diào)到最大，用萬用表測量燈電壓，旋轉(zhuǎn)機內(nèi)粗條電位器。當萬用表顯示的燈電壓為最大時，停止調(diào)整，此現(xiàn)象即消失。4、波長超差波長誤差在檢定結(jié)果上可分為兩種情況：第一種情況為，誤差方向一致，并呈線性，可通過轉(zhuǎn)動波長度盤消減波長誤差。第二情況為，誤差方向不一致，有正差有負差。誤差的變化可提示一個使誤差呈線性的調(diào)整方向，光度計然后轉(zhuǎn)動波長度盤消除線性誤差，依然超差的部分，再通過調(diào)節(jié)準直螺釘，使波長誤差方向一致并呈線性，再配合移動波長度盤，使誤差調(diào)到最小，如此反復調(diào)整。對于第二種情況波長誤差的調(diào)整方法通常為：使用干涉濾光片的標準峰值波長為438．2rim、553．5nm、638．5nm，調(diào)整準直鏡，使580nm處樣品室為黃光，測得峰值波長為420nm、550nm、640nm，最大最小峰值差為640nm-420nm=220nm，標準鋒值差 638．5nm-438．2nm=200．3nm，調(diào)準直鏡使紅片峰值在650nm，測紫片為422nm，峰值差為228nm，說明調(diào)整方向不對，再用紅片調(diào)整準直鏡~q628nm，測紫片為423nm，峰值差為205nm，接近于標準峰值差，此時，逆時針轉(zhuǎn)動波長度盤，由423nm至438nm，測得峰值為436nm、558nm、642nm，此時誤差在合格范圍內(nèi)。另外，如果用標準波長為466．2nm、554．Onm、676．3nm的干涉濾光片測得 721分光光度計的波長為476nm、554nm、664nm，最大最小峰值差為 188nm，而標準峰值差為210．1nm，需要擴展。用紅片調(diào)至686nm，測另兩片為567nm、483nm。此時順時針轉(zhuǎn)動波長度盤 1 9nm，測得值為474nm、557nm、679nm，再順時針轉(zhuǎn) 4nm，測得值為 467nm、550nm、672nm，誤差合格。由此可見，光度計通過觀察所測數(shù)據(jù)的變化，可使儀器的狀態(tài)逐步得到改善，直至合格。一般情況下，當儀器波長范圍需要擴展時 (即實測儀器兩端的波長差小于標準波長差)，可調(diào)準直鏡螺絲，使峰值波長測得值高于標準值波長，然后順時針移動波長度盤，若儀器波長需要縮小時 (即實測儀器兩端的波長差大于標準波長差)，可調(diào)整準直鏡螺絲，使峰值波長測得值低于標準值波長，然后逆時針移動波長度盤，通過這種反復細致的調(diào)整，可是儀器處于良好狀態(tài)。紫外可見分光光度計可用于物質(zhì)的定量分析、結(jié)構(gòu)分析和定量分析。而且還能測定某些化合物的物理化學參數(shù)，如摩爾質(zhì)量、配合物的配合比例和穩(wěn)定常熟、酸堿電離常數(shù)等。紫外可見吸收光譜是物質(zhì)中分子吸收200-800nm光譜區(qū)內(nèi)的光而產(chǎn)生的。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級躍遷(原子或分子中的電子，總是處在某一種運動狀態(tài)之中。每一種狀態(tài)都具有一定的能量，屬于一定的能級。這些電子由于各種原因(如受光、熱、電的激發(fā))而從一個能級轉(zhuǎn)到另一個能級，稱為躍遷。)當這些電子吸收了外來輻射的能量就從一個能量較低的能級躍遷到一個能量較高的能級。因此，每一躍遷都對應著吸收一定的能量輻射?？梢姺止夤舛扔嬀哂胁煌肿咏Y(jié)構(gòu)的各種物質(zhì)，有對電磁輻射顯示選擇吸收的特性。吸光光度法就是基于這種物質(zhì)對電磁輻射的選擇性吸收的特性而建立起來的，它屬于分子吸收光譜。吸光光度法也稱做分光光度法，即儀器進行分光并用光度法測定，這類儀器包括了分光光度計與原子吸收光譜儀。吸光光度法的本質(zhì)是光的吸收，因此稱吸光光度法比較合理，當然，稱分子吸光光度法是最確切的緊外可見分光光度計法對無機元素的定性分析應用較少，無機元素的定性分析可用原子發(fā)射光譜法或化學分析的方法。在有機化合物的定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析中，由于紫外可見光譜較簡單，特征性不強，因此該法的應用也有一定的局限性。但是它適用于光度計不飽和有機化合物。尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結(jié)構(gòu)。此外，可配合紅外光譜、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法進行定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析，因此它仍不失為是一種有用的輔助方法。一般有兩種定性分析方法，比較吸收光譜曲線和用經(jīng)驗規(guī)則計算最大吸收波長λmax，然后與實測值進行比較?？梢姺止夤舛扔嬜贤饪梢姺止夤舛榷糠治龅囊罁?jù)是Lambert-Beer定律，即在一定波長處被測定物質(zhì)的吸光度與它的溶度呈線性關系。應此，通過測定溶液對一定波長入射光的吸光度可求出該物質(zhì)在溶液中的濃度和含量。種常用的測定方法有：單組分定量法、多組分定量法、雙波長法、示差分光光度法和導數(shù)光譜法等。紫外可見分光光度計的類型很多，可見分光光度計但可歸納為三種類型：單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。單光束分光光度計，經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶掖，以進行吸光度的測定。這種類型的分光光度計結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析；雙光束分光光度計，經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡(M1)分解為弧度相等的兩束光，一束通過參比池，另一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品他，還能自動消除光源強度變化所引起的誤差；雙波長分光光度計，光度計由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個單色器，得到兩束不同波長的單色光;再利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)?？梢姺止夤舛扔嬰p波長分光光度計的優(yōu)點：對于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)的分析，以及存在背景于擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計，能獲得導數(shù)光譜。通過光學系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長分光光度計能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長工作方式。如果能在光度計兩波長處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線，還能進行化學反應動力學研究。可見分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器。 通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析。 常用的波長范圍為：(1)200～400nm的紫外光區(qū),(2)400～760nm的可見光區(qū),(3)2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外可見分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。紫外可見分光可見分光光度計光度計測的是分子在紫外光區(qū)的吸收強度，紫外可見分光光度計可用于大部分有色物質(zhì)的定量監(jiān)測，通常需要使用各種各樣的顯色劑。紫外可見分光光度計的常用參數(shù)：光度計紫外可見分光光度計的吸光度范圍：-0.301-1.999A紫外可見分光光度計的波長范圍：200-1000nm  濃度顯示范圍：0-1999波長準確度：±2nm   雜散光：≤0.5%T@220nm、360nm波長重復性：1nm        穩(wěn)定性：±0.003A/小時光譜帶寬：4nm    配有RS232通訊接口透射比準確度：±0.5%T    打印機：支持透射比重復性：0.2%T    應用軟件：支持可見分光光度計透射比范圍：0.0-125%T    光度計的分類很多，包括了可見分光光度計、紫外可見分光光度計、雙束紫外可見分光光度計、智能可見分光光度計等。光度計智能可見分光光度計比較智能，用途也比較廣，它的主要功能特點有：●智能可見分光光度計廣泛應用于冶金、機械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學、環(huán)境保護、食品、●單片機控制程序運行及數(shù)據(jù)處理；●高精度全息平面光柵分光，零點、滿程自動調(diào)整；●數(shù)顯直讀、打印質(zhì)量分數(shù)，T、A、C任意切換；●智能可見分光光度計可存儲20條工作曲線，具有斷電保護功能。智能可見分光度計的常用參數(shù)：●智能可見分光光度計的波長范圍： 330～830nm ；●智能可見分光光度計的波長準確度： ±2nm ；●波長重復性： 1nm； ●智能可見分光光度計的光譜帶寬： 6nm；●透射比準確度：±0.5%T（在546.1nm處）；●雜散光：優(yōu)于1.0%T（在360nm處）；●可見分光光度計智能可見分光光度計的測量范圍： 透射比0-100%T 吸光度 0～1.999A 濃度 0～9999單位。光度計主要是用來測量不同波長的光譜，從而對物質(zhì)進行定量分析。西安紫外可見分光光度計是對波長在紫外光區(qū)里波長的測量，測量的原理是，物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量， 相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有特有的、固定的吸收光譜曲線，可見分光光度計可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。紫外可見分光光度計的應用波長范圍為200～400nm的紫外光區(qū)、400～850nm的可見光區(qū)。
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